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植物組培室,即植物組織培養(yǎng)室,主要用于藥品配置、消毒處理、接種、培養(yǎng)等。組配實驗室基本由洗滌室、配置室、消毒室、接種室、培養(yǎng)室、觀察室、馴化室構(gòu)成。組配實驗室的設計原則主要是防止污染、經(jīng)濟、布局合理科學、規(guī)劃設計符合當?shù)貤l件。 組織培養(yǎng)凈化工程的要點在于無菌接種室和無菌培養(yǎng)室的建設設計。無菌組培接種室的凈化級別最好做到萬級,用超凈工作臺達到局部百級,主要的接種任務都是在超凈工作臺內(nèi)完成;...
植物組培室,即植物組織培養(yǎng)室,主要用于藥品配置、消毒處理、接種、培養(yǎng)等。組配實驗室基本由洗滌室、配置室、消毒室、接種室、培養(yǎng)室、觀察室、馴化室構(gòu)成。組配實驗室的設計原則主要是防止污染、經(jīng)濟、布局合理科學、規(guī)劃設計符合當?shù)貤l件。
組織培養(yǎng)凈化工程的要點在于無菌接種室和無菌培養(yǎng)室的建設設計。無菌組培接種室的凈化級別最好做到萬級,用超凈工作臺達到局部百級,主要的接種任務都是在超凈工作臺內(nèi)完成;照度大于300LUX,壓差相鄰區(qū)域5Pa,對于普通區(qū)域大于10Pa;溫濕度常規(guī)即可。
一、組織培養(yǎng)凈化工程的設計、凈化要求和注意事項
1. 接種間按照萬級凈化級別設計;培養(yǎng)室按照十萬級凈化級別設計。
2. 換氣次數(shù):十萬級換氣次數(shù)15-18次/h;三十萬級換氣次數(shù)12-15次/h;整體萬級房間換氣次數(shù)為25-30次/h;局部百級換氣次數(shù)為:送風口截面積*氣流速度(5m/s)*3600/容積。
3. 風量計算:送風口*3600*風速(0.35-0.5m/s)。
4. 壓力值:車間核心工作間的氣壓(負壓)與室內(nèi)大氣氣壓的壓差值小于10pa;與相鄰房間壓差(負壓)不小于5pa。防護區(qū)各房間最小換氣次數(shù)不小于12次/h;房間壓力值是在實驗操作使用狀態(tài)下的壓力,無實驗操作時房間無壓力梯度。
5. 氣流方向:氣流組織上送下排風,過濾器排風口下邊沿離地面不低于0.1m且不宜高于0.15m;上邊沿高度不宜超過地面之上0.6m,排風口排風速度不宜大于1m/s。
二、組培凈化車間實驗室的設計布局
1. 組織培養(yǎng)凈化工程之洗滌滅菌室
功能:完成各種器具的洗滌、干燥、保存、培養(yǎng)基的滅菌等。
設備:水池、落水架、中央實驗臺、高壓滅菌鍋、超聲波清洗器、干燥滅菌器(如烘箱)等。
要求:洗滌滅菌室根據(jù)工作量的大小決定其大小,一般面積控制在30~50 m2。在實驗室的一側(cè)設置專用的洗滌水槽,用來清洗玻璃器皿。中央實驗臺還應配置2個水槽,用于清洗小型玻璃器皿。準備1~2個洗液缸,專門用于洗滌對潔凈度要求很高的玻璃器皿,地面應耐濕并排水良好。
2. 組織培養(yǎng)凈化工程之準備室(又叫化學實驗室)
功能:進行一切與實驗有關的準備工作:完成所使用的各種藥品的貯備、稱量、溶解、器皿洗滌、培養(yǎng)基配制與分裝、培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿的滅菌、培養(yǎng)材料的預處理等。
設備:準備室應具備實驗臺、藥品柜、水池、儀器、藥品、防塵櫥(放置培養(yǎng)容器)、冰箱、天平、蒸餾水器、酸度計及常用的培養(yǎng)基配制用玻璃儀器等。
要求:20 m2左右。要求寬敞明亮、以便于放置多個實驗臺和相關設備,方便多人同時工作;同時要求通風條件好,便于氣體交換;實驗室地面應便于清潔,并應進行防滑處理。
3. 組織培養(yǎng)凈化工程之培養(yǎng)室
功能:培養(yǎng)離體材料,對接種到培養(yǎng)瓶等器皿中的植物離體材料進行控制條件下的培養(yǎng),無論是研究性實驗室還是生產(chǎn)性實驗材料進行培養(yǎng)的場所。
設備:培養(yǎng)架(控溫控光控濕)、搖床、轉(zhuǎn)床、自動控時器、紫外燈、光照培養(yǎng)箱或人工氣候箱、生化培養(yǎng)箱、邊臺實驗臺用于拍攝培養(yǎng)物生長狀況,除濕機、顯微鏡、溫濕度計、空調(diào)等。
要求:約需10~20 m2左右,培養(yǎng)室的大小可根據(jù)需要培養(yǎng)架的大小、數(shù)目、及其他附屬設備而定,其設計以充分利用空間和節(jié)省能源為原則?;疽笫悄軌蚩刂乒庹蘸蜏囟?,并保持相對的無菌環(huán)境;為滿足植物培養(yǎng)材料生長對氣體的需要,還應安裝排風窗和換氣扇等培養(yǎng)室的換氣裝置;為節(jié)省能源和空間,應配置適宜的培養(yǎng)架,并安裝日光燈照明。
4. 組織培養(yǎng)凈化工程之無菌操作室(接種室)
功能:主要用于植物材料的消毒、接種、培養(yǎng)物的轉(zhuǎn)移、試管苗的繼代、原生質(zhì)體的制備以及一切需要進行無菌操作的技術程序,是植物離體培養(yǎng)研究或生產(chǎn)中最關鍵的一步。
設備:紫外燈、空調(diào)、解剖鏡、消毒器、酒精燈、接種器械(接種鑷子、剪刀、解剖刀、接種針),實驗臺、和擱架,還有超凈工作臺和整套滅菌接種儀器、藥品等。
要求:接種室宜小不宜大,一般10~20 m2即可。要求封閉性好,干爽安靜,清潔明亮,能較長時間保持無菌,因此不宜設在容易受潮的地方;地面、天花板及四壁盡可能密閉光滑,易于清潔和消毒;配置拉動門,以減少開關門時的空氣擾動;為便于消毒處理,地面及內(nèi)墻壁都應采用防水和耐腐蝕材料;為了保持清潔,無菌室應防止空氣對流。接種室要求在適當位置吊裝 1~2盞紫外線滅菌燈,用以照射滅菌。安裝一小型空調(diào),使室溫可控,這樣可使門窗緊閉,減少與外界空氣對流。
5. 組織培養(yǎng)凈化工程之
功能:進入無菌室前的一個緩沖場地,減少人體從外界帶入的塵埃等污染物。工作人員在此換上工作服、拖鞋,戴上口罩,才能進入無菌室和培養(yǎng)室。進入無菌操作室前在此更衣?lián)Q鞋,以減少進出時帶入接種室雜菌。
設備:1~2盞紫外燈、水槽、實驗臺、鞋帽架、柜子、滅菌后的工作服、拖鞋、口罩。
要求:緩沖間需3~5 m2,可建在準備室外或無菌操作室外,應保持清潔無菌;備有鞋架和衣帽掛鉤,并有清潔的實驗用拖鞋、已滅菌過的工作服;墻頂用1~2盞紫外燈定時照射,對衣物進行滅菌。緩沖間也安一盞紫外線滅菌燈,用以照射滅菌。緩沖間的門應該與接種室的門錯開,兩個門也不要同時開啟,以保證無菌室不因開門和人的進出帶進雜菌。
6. 組織培養(yǎng)凈化工程之馴化棚室
功能:組培苗馴化移栽。
設備:環(huán)控設施。彌霧裝置、遮陽網(wǎng)、暖氣或地熱地熱線、移栽床等設施;塑料缽、花盆、穴盤等移栽容器;草炭、沙子等移栽基質(zhì)。
設計要求:室內(nèi)馴化與設施下馴化均可